SARSに対するうがい薬中の塩化セチルピリジニウムの抗ウイルス効果

Scientific Reports volume 12、記事番号: 14050 (2022) この記事を引用

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うがい薬に含まれる第 4 級アンモニウム化合物である塩化セチルピリジニウム (CPC) は、細菌、真菌、エンベロープウイルスに対して効果があります。この研究は、SARS-CoV-2に対するCPCの抗ウイルス効果を調査するために実施されました。 0.001%～0.005% (10～50 μg/mL) などの低濃度での野生型 SARS-CoV-2 に対する CPC の効果に関する報告はほとんどありません。興味深いことに、低濃度の CPC は唾液中でもヒト分離 SARS-CoV-2 株 (武漢、アルファ、ベータ、ガンマ) の感染力を抑制することがわかりました。さらに、スクロース密度分析と電子顕微鏡検査を使用して、CPCがウイルスエンベロープを破壊することなく抗SARS-CoV-2効果を示すことを実証しました。結論として、この研究は、CPC が低濃度でも SARS-CoV-2 感染を阻害する可能性があるという実験的証拠を提供しました。

ジョンズ・ホプキンス医科大学のコロナウイルス・リソース・センターからの最近の情報1によると、新型コロナウイルス感染症は世界中で4億2,000万人以上の感染者と約600万人の死者を出しています。

SARS-CoV-2 は最初に中国の武漢で報告され 2、一部の注目変異株および懸念変異株 (VOC) も報告されています 3。さらに、デルタやオミクロンのような一部の変異種には、ワクチンによる免疫を回避する能力があるのではないかと懸念されています4、5、6。したがって、科学者らは、ワクチン接種率が増加した後もSARS-CoV-2のパンデミックが続く可能性があると懸念している。

SARS-CoV-2 は、ウイルス侵入因子、アンジオテンシン変換酵素 2 (ACE2)、および膜貫通プロテアーゼセリン (TMPRSS) メンバーを発現する口腔粘膜および唾液腺の上皮細胞に感染することが報告されています。したがって、このように口腔は SARS-CoV-2 の感染と伝播において重要な役割を果たしています。口腔に関連する COVID-19 の症状は味覚障害や口内炎ですが 8,9、SARS-CoV-2 感染者の多くは無症状である可能性があり、その結果他の人に感染する可能性があります。

SARS-CoV-2 は口腔内で複製し、唾液中に放出される可能性があります7。さらに、SARS-CoV-2 は呼吸上皮で複製する可能性があり 10、咳によって口腔に感染する可能性があります。飛沫および/またはエアロゾルを介した SARS-CoV-2 の伝播は、肺胞上皮細胞での感染と複製を引き起こし、肺胞損傷を引き起こします 11。さらに、SARS-CoV-2 の感染は、会話、咳、くしゃみなどの呼気活動による飛沫を介して発生すると報告されています12,13。興味深いことに、SARS-CoV-2 感染者は、ウイルスの無症候性潜伏期間中でも感染源となる可能性があります 14。したがって、私たちは新型コロナウイルス感染症に対する予防戦略を調査する必要があります。さらに、SARS-CoV-2を含む唾液からの飛沫の誤嚥と新型コロナウイルス感染症の重症化との関係が報告されている15。したがって、口腔ケアは SARS-CoV-2 の感染を防ぐために重要です。

うがい薬はマイクロバイオーム感染の予防に重点を置いています16。さらに、うがい薬のいくつかの成分が口腔内の SARS-CoV-2 ウイルス粒子を減少させることが最近報告されています 17,18。塩化セチルピリジニウム (CPC) は、うがい薬、錠剤、スプレー、ドロップの殺菌成分の 1 つとして広く使用されています。 CPC は、物理化学的相互作用を通じて脂質膜を破壊する可能性があります。 CPC には、インフルエンザウイルス 19 やコロナウイルス 20、21、22 に対する抗ウイルス効果だけでなく、殺菌効果があることがすでに報告されています。ポビドンヨードやクロルヘキシジン（CHX）などのうがい薬の他の成分と比較。 CPC は無味無臭であるため、オーラルケア製品への用途に適しています。現在まで、SARS-CoV-2 に対する CPC の殺ウイルス活性を示す報告はほとんどありません。セネヴィラトネら。らは、CPCが対照水と比較して4人の新型コロナウイルス感染症患者4人の唾液中のSARS-CoV-2のウイルス量を減少させたと報告したが、唾液中のウイルス感染力については記載されていない。最近の報告では、シュードウイルスに対する市販のうがい薬中の CPC よりもはるかに低い濃度での CPC の効果が示されました 24。しかし、唾液中の野生型 SARS-CoV-2 に対する 0.001% ～ 0.005% (10 ～ 50 μg/mL) などの低濃度での CPC の効果に関する報告はありません。日本では、市販のうがい薬中の CPC 濃度はほぼ 30 ～ 50 μg/mL であり、これまでの報告で使用されているうがい薬よりもはるかに低いです 24,25。したがって、我々は低濃度での SARS-CoV-2 に対する CPC の抗ウイルス効果を調べました。さらに、CPCの抗SARS-CoV-2活性のメカニズムをショ糖密度分析と電子顕微鏡観察によって調べました。

私たちは、VOC に属する武漢、アルファ、ベータ、ガンマを含む SARS-CoV-2 株を検査しました。プラークアッセイでは、CPCが用量依存的に直接、検査したすべてのSARS-CoV-2の感染力を有意に抑制することが実証されました（図1a〜d、S1）。 CPC（50μg/mL）処理は、Triton X-100（1％）と同様にSARS-CoV-2武漢株を完全に不活化しました（図1e）。同濃度のCPCを含む市販のうがい薬（SP-T医療用うがい薬：SP-T）は、妨害成分を含まないCPC液よりも優れた抗ウイルス効果を示しました。 SP-Tで処理したSARS-CoV-2のウイルス力価は、検出限界2.0×103PFU/mLを下回りました（図S2）。これらの結果は、市販のうがい薬（50 μg/mL）よりも低い濃度の CPC（10 ～ 40 μg/mL）が、VOC を含む多くの菌株で抗 SARS-CoV-2 効果を示すことを示しました。

TMPRSS2 遺伝子を発現する Vero E6 細胞 (VeroE6/TMPRSS2) を用いたプラークアッセイによる、SARS-CoV-2 に対する CPC の抗ウイルス効果。ウイルス力価を計測し、室温で CPC (0 ～ 40 μg/mL) で処理した SARS-CoV-2 武漢 (a)、アルファ (b)、ベータ (c)、およびガンマ (d) 株のウイルス力価を測定しました。 30 分を定量化し、PFU/mL として表しました。プラークアッセイも、PBS、CPC (50 μg/mL)、または Triton X-100 (1%) の存在下で 10 分間実施しました。その後、サンプルを PD-10 カラムで濾過して試薬を除去しました (e)。統計分析は一元配置分散分析を使用して実行されました。 (*p < 0.05)。

次に、SARS-CoV-2 の細胞侵入に対する CPC の影響を評価しました。 VeroE6/TMPRSS2 細胞は、感染多重度 (MOI) 0.01 で CPC 処理した SARS-CoV-2 武漢株に感染しました。細胞内のウイルス RNA 発現レベルは、感染後 24 時間で CPC により用量依存的に有意に減少しました (図 2)。ウイルス RNA コピー数は、コントロールと比較して、15 μg/mL の濃度での CPC によって約 30 分の 1 に減少しました。これらのデータは、感染性ビリオンの量が細胞侵入前にCPCによって減少することを示した。すべての実験は、細胞毒性を引き起こさない濃度で CPC を使用して実行されました (図 S3)。

qRT-PCR による SARS-CoV-2 に対する CPC の抗ウイルス効果。 VeroE6/TMPRSS2細胞に、等量のCPCを混合した後、感染多重度（MOI）0.01でSARS-CoV-2武漢株を接種した。感染後 24 時間で、ウイルス N タンパク質 RNA の相対レベルを qRT-PCR によって定量的に評価しました。 (*p < 0.05)。

多くのタンパク質を含み粘性の高い唾液中のSARS-CoV-2に対してCPCが有効であるかどうかを検討するために、我々は健康なボランティアから採取した唾液中でCPCとインキュベートした後、プラークアッセイによってSARS-CoV-2武漢株の感染力を測定した。プラークアッセイでは、唾液中のSARS-CoV-2に対するCPC（25～40μg/mL）の阻害効果が用量依存的に有意に示された（図3）。

TMPRSS2遺伝子を発現するVero E6細胞（VeroE6/TMPRSS2）を用いたプラークアッセイによる、唾液によるSARS-CoV-2に対するCPCの抗ウイルス効果。 SARS-CoV-2武漢株を唾液に加え、等量のCPCと混合した。 (*p < 0.05)。

SARS-CoV-2 感染力に対する CPC のメカニズムを分析するために、1 × リン酸緩衝生理食塩水 (PBS)、CPC (50 μg/mL)、または Triton X のいずれかで処理した SARS-CoV-2 ビリオンのショ糖密度分析を実行しました。 100 (1%)、室温で 10 分間 (図 4a)。 SARS-CoV-2 S および N タンパク質は、勾配全体にわたって特異的な分布を示しました。 Triton X-100 で処理したビリオンではバンドシフトが観察されました。ただし、その画分は PBS または CPC で処理したものとは異なりました。言い換えれば、PBS と CPC は SARS-CoV-2 ビリオンの構造に影響を及ぼさない可能性がありますが、Triton X-100 は構造を変化させました。さらに、ビリオンの形態を透過型電子顕微鏡 (TEM) によって分析しました。電子顕微鏡分析により、PBSで処理したSARS-CoV-2の球状粒子構造は変化していないことが明らかになった。また、10 µg/mL CPC で処理したウイルス粒子のほとんどは変化しないままでしたが、50 µg/mL CPC では一部のウイルス粒子が崩壊したこともわかりました。対照的に、250 µg/mL CPC で処理したほとんどすべてのウイルス粒子は明らかに破壊されました (1% Triton X-100 など)。 50 μg/mL という量は、すべてのウイルス粒子が粉砕されない濃度と考えられました。この結果は、スクロース密度分析データと一致しています (図 4b)。

SARS-CoV-2 粒子のスクロース密度分析と TEM 分析。 (a) 1 × PBS、CPC (50 μg/mL)、および Triton X-100 (1%) の存在下でのキャプシド集合体のスクロース密度分析。 SARS-CoV-2 武漢株を記載の試薬で 10 分間処理し、処理されたビリオンを密度勾配超遠心分離に適用しました。各画分をSDS-PAGEに供し、Sタンパク質およびNタンパク質に対する抗体を用いたウェスタンブロッティングにより分析した。 (b) 試薬で処理した後の SARS-CoV-2 ビリオンの電子顕微鏡写真。 SARS-CoV-2 武漢株を 1 × PBS、CPC (10、50、250 μg/mL) および Triton X-100 (1%) で室温で 10 分間処理しました。各スケールバーは 50 nm を表します。

本研究では、50 μg/mL 以下の低濃度の CPC が SARS-CoV-2 武漢株およびアルファ株、ベータ株、ガンマ株を含む VOC の感染力を抑制することを実証しました。 CPCは唾液中でもSARS-CoV-2に対する殺ウイルス効果を示した。したがって、低濃度の CPC が SARS-CoV-2 に対して十分な抗ウイルス活性を発揮することがわかりました。 CPC は脂質二重層を破壊するため、高濃度の CPC は細胞毒性効果を発揮する可能性があります。そのため、CPCは低濃度で長時間効果を発揮できる製剤として適用することができます。プロトタイプのうがい薬配合物には、実験で使用された低レベルの CPC を抑える他の妨害成分が含まれている可能性があるため、同じ濃度の CPC を含む市販のうがい薬をテストしました。これは、妨害成分を含まない CPC 溶液と同等以上の抗ウイルス効果を示しました (図S2)。さらに、抗ウイルス効果は脂質膜の破壊によるものではなく、SARS-CoV-2タンパク質の変性によるものである可能性があることを示唆できます。

CPC は SARS-CoV-2 アルファ変異体に対して有効であることが報告されています24。私たちの研究では、CPC が低濃度でさらに 2 つの変異株 (ベータ株とガンマ株) の感染力を弱めることが明らかになりました。 1時間のCPC処理は、40μg/mLまでVeroE6/TMPRSS2に対する細胞毒性を示さなかった（図S3）。さらに、以前の研究では、より高濃度の CPC (500 ～ 750 μg/mL) を含むうがい薬が使用されました 24,25。これらの濃度では、細胞の脂質膜が損傷される可能性があると考えられます。

CPCを含むうがい薬の抗ウイルス効果の持続期間はまだ明らかではありません。しかし、我々の結果は、より低い濃度でも抗ウイルス効果を示すのに十分であることを示唆しています。この実験の制限として、CPC がうがい薬として適用される場合、作用持続時間は 1 分以内であると想定されます。ただし、実験手法の複雑さとサンプル間の作用時間の誤差の可能性を考慮して、本研究では最小作用時間は10分に設定されました。この点に関して、Anderson et al. らは、CPC26を中和する方法を用いて、作用時間30秒におけるCPCの効果を明らかにした。したがって、CPC を安全な濃度で放出でき、口腔内にできるだけ長く保持できる錠剤、滴下剤、パッチなどの新製品を開発することが正当化されます。

われわれは、CPCがさまざまなタンパク質を含む粘稠な唾液におけるSARS-CoV-2の感染力を抑制することを示した。ただし、唾液ではPBSに比べて効果が弱まるそうです。これは、負に帯電した唾液タンパク質の存在、粘性およびミセル形成による拡散効率の低下による可能性があります27。しかし、低濃度のCPCでもSARS-CoV-2感染力の十分な抑制が示された。実際の新型コロナウイルス感染症患者の唾液中の SARS-CoV-2 の感染力に対する低濃度の CPC の抑制効果はまだ解明されていない。

SARS-CoV-2 の感染力を抑制する作用機序は、ウイルスエンベロープの破壊によるものと考えられています。この研究は、CPCが実験の濃度と期間においてウイルス粒子を破壊することなくSARS-CoV-2を不活化することを示した。高濃度（250～500 μg/mL）の CPC が SARS-CoV-222 のエンベロープを破壊することが報告されています,28。したがって、CPC 濃度に依存して形態的破壊の程度は異なります。言い換えれば、ウイルスを不活化するのに十分な濃度では、粒子はくしゃくしゃになりますが、粉々にはなりません。これらの結果は、ショ糖密度勾配分析の結果と一致しています。さらに、上記の理由により、我々の研究で示された CPC の抗ウイルス機構は、CPC が主に脂質膜に干渉するという発見を裏付けています 29。図 4b は、さまざまなサイズのウイルス粒子を示しています。以前の報告では、SARS-CoV-2 の直径は約 60 ～ 140 nm で変動していましたが、これは現在の結果と一致しています 2、5、30。ただし、低濃度の CPC による SARS-CoV-2 の不活化の詳細なメカニズムはまだ不明です。私たちの結果は、S タンパク質の変性効果が侵入に関与している可能性を示唆しており、それが重要な役割を果たしていると思われます。

ウイルスの生体への侵入は、口腔および鼻腔を介して行われると考えられています31。 CPC を含む点鼻スプレーを使用し、鼻腔内のウイルスの量を減らすことで、新型コロナウイルス感染症の制御につながる可能性があります。しかし、これまでのところ、CPC 点鼻スプレーの使用を示した報告はなく、その予防効果はまだ不明です。

現在、我々は、患者の唾液中のSARS-CoV-2ウイルス量に対するCPCの影響を扱う、新型コロナウイルス感染症患者におけるCPCの効果を調べる臨床研究を実施している。唾液中のウイルス量が少ないと、感染率が低くなり、病気の進行が遅くなる可能性があります。

CPC を含む製品の使用は、新規感染した新型コロナ患者の数の減少につながる可能性があります。さらに、ワクチン接種が不十分な国では予防策の手段となる可能性もあります。 SARS-CoV-2の発症や感染を予防するツールの一つとしてCPCが活用されることが期待されます。

Vero E6 (ATCC、米国バージニア州マナッサス) 細胞を、10% ウシ胎児血清 (FBS) (v/v) を添加したダルベッコ変法イーグル培地 (DMEM) で維持し、37 °C、5% CO2 でインキュベートしました。 Vero E6 安定発現ヒト TMPRSS2 (VeroE6/TMPRSS2) 細胞 32 もこの研究に使用されました。

SARS-CoV-2 武漢 (WK-521; EPI_ISL_408667)、アルファ (QK002; EPI_ISL_768526)、ベータ (TY8-612; EPI_ISL_1123289)、およびガンマ (TY7-501; EPI_ISL_833366) 株は、西條医師 (国立研究開発法人国立病院機構) のご厚意により提供されました。感染症研究所、東京、日本）。これらのウイルスは、VeroE6/TMPRSS2 細胞を使用して調製されました。 SARS-CoV-2を用いたすべての実験は、北海道大学国際人獣共通感染症研究所のバイオセーフティレベル3（BSL-3）施設（承認番号：19(19)、#21002-3）で実施され、基準に従って行われた。 BSL-3 の操作手順。なお、病原体を用いた実験計画はすべて北海道大学大学院歯学研究科の承認を受けています（承認番号：R-2-4-1）。

CPC (TCI、東京、日本) を脱イオン蒸留水 (DDW) で溶解し、フィルター (直径 0.45 μm) (Sartorius、ゲッティンゲン、ドイツ) で滅菌しました。さらに、界面活性剤である Triton X-100 (Sigma-Aldrich、セントルイス、ミズーリ州、米国) をポジティブコントロールとして使用しました。 PBSを陰性対照として使用した。

唾液は、ワクチン接種を受けていない健康なボランティア 5 名から提供されました。すべての唾液サンプルは、実験前に定量的逆転写ポリメラーゼ連鎖反応 (qRT-PCR) によって SARS-CoV-2 に対して陰性であることが確認され、1 つのチューブ内で混合されました。この実験は、北海道大学の倫理委員会によってヒト由来材料の使用が承認されました。唾液を採取する前に各ボランティアからインフォームドコンセントを得た（承認番号：2021-2）。

VeroE6/TMPRSS2 の細胞生存率は、CellTiter 96 を使用した MTS [3-(4,5-ジメチルエチルチアゾール-2-イル)-5-(3-カルボキシメトキシフェニル)-2-(4-スルホフェニル)-2H-テトラゾリウム] アッセイによって測定されました。 AQueous One Solution (Promega、米国ウィスコンシン州マディソン) を、さまざまな濃度の CPC (0 ～ 50 µg/mL) の存在下、37 °C で 1 時間洗浄します。吸光度は、ＧｌｏＭａｘＭｕｌｔｉｐｌｕｓＰｌａｔｅＲｅａｄｅｒ／Ｌｕｍｉｎｏｍｅｔｅｒ（Ｐｒｏｍｅｇａ）で測定した。 3 つの独立した実験を 3 回繰り返して実行しました。

SARS-CoV-2株を、希釈した等量のCPC溶液（最終濃度：2％FBSを含むDMEMで0～50μg/mL）またはSP-T医療用うがい薬（ライオン株式会社、東京、日本）と混合した。 CPC と同様に、PBS で 50 μg/mL の濃度にします。混合物を室温で３０分間インキュベートし、２％ＦＢＳＤＭＥＭで１／１０に希釈して、混合物中のＣＰＣを減少させた。希釈した混合物を VeroE6/TMPRSS2 細胞に接種し、回転させながら 37 °C で 1 時間インキュベートしました。インキュベーション後、細胞を 1 × PBS で 2 回洗浄して CPC を除去し、1.2% Bacto Agar (Becton Dickinson、Franklin Lakes、NJ、USA) を含む 2% FBS DMEM で重層しました。 37℃で48時間インキュベートした後、細胞を3.7%緩衝ホルムアルデヒドで一晩固定しました。固定した細胞を 1% クリスタルバイオレットで染色しました。 SARS-CoV-2 に感染した細胞は細胞変性効果を示し、感染した細胞塊はプラークなどの染色されていない領域として見ることができます。

VeroE6/TMPRSS2 細胞を 1.0 × 105 細胞/ウェルの密度で 24 ウェルプレートに播種しました。 SARS-CoV-2 武漢株を等量の CPC と混合しました (最終濃度: 0 ～ 25 μg/mL)。各薬物濃度で、ウェルに 1.0 × 103 PFU (MOI = 0.01) のウイルスを感染させました。混合物を室温で30分間インキュベートした。インキュベーション後、混合物を VeroE6/TMPRSS2 細胞に接種し、回転させながら 37 °C で 1 時間インキュベートしました。 1 時間の吸収後、細胞を 1 × PBS で 2 回洗浄して CPC を除去し、維持培地で培養しました。感染後 24 時間 (hpi) で、TRIzol™ 試薬 (Thermo Fisher Scientific、米国マサチューセッツ州ウォルサム) を使用して接種細胞から全 RNA を抽出し、RNeasy Mini Kit (QIAGEN、ドイツ、ヒルデン) で全 RNA を抽出しました。抽出した RNA を、THUNDERBIRD Probe One-step qRT-PCR Kit (TOYOBO、大阪、日本) を使用して qRT-PCR 分析に供しました。 SARS-CoV-2 ゲノムは、N2 用のプライマープローブセット (日本、滋賀県宝) を使用して定量されました。非ヒト霊長類のβ-アクチンを内在性対照として使用した。非ヒト霊長類 β-アクチンのプライマーおよびプローブ配列は以前に記載されています 33。 SARS-CoV-2 の N 遺伝子のレベルは、β-アクチン mRNA のレベルで正規化されました 34。さらに、24 hpi でのウイルス RNA レベルは 0 hpi でのウイルス RNA レベルで正規化されました。すべての RT-PCR 検査は、CFX96 リアルタイム PCR システム (BioRad、米国カリフォルニア州ハーキュリーズ) を使用して実行されました。 3 つの独立した実験を 3 回繰り返して実行しました。

健康なボランティアから採取した唾液にSARS-CoV-2武漢株を加え、等量のCPCと混合した（最終濃度：0～40μg/mL）。唾液混合物を 1/100 に希釈して粘度を下げ、0.45 μm フィルター (Sartorius) で濾過して細菌と真菌を除去しました。プラークアッセイは、以前に記載されているように実施した（セクション「プラークアッセイ」）。 3 つの独立した実験を 3 回繰り返して実行しました。

SARS-CoV-2武漢株をCPC（50μg/mL）またはTriton X-100（1％）で室温で10分間処理した。インキュベーション後、混合物を 10% ～ 50% のスクロース密度勾配の上にロードしました。 Optima XE-90 (Beckman Coulter、Brea、CA、USA) で 250,000 xg で 6 時間超遠心分離した後、各 100 μL の勾配を 22 の画分に分画し、100 μL の SDS-PAGE サンプルバッファーと混合し、95 ℃で煮沸しました。 ℃で5分間。煮沸後、10％SDS-PAGEで分析し、続いてマウスモノクローナル抗SARS-CoV-2 Sタンパク質（GTX632604）またはウサギポリクローナルNタンパク質（GTX135357）抗体（GeneTex、米国カリフォルニア州アーバイン）を使用したイムノブロット分析を行った。転写後、膜を100 kDaで切断し、Sタンパク質抗体およびNタンパク質抗体とそれぞれハイブリダイズさせ、視覚化に供した。 ImageQuant LAS 4000 mini (富士フイルム株式会社、東京、日本) をイメージングに使用しました (図 S4)。

SARS-CoV-2 武漢株を 1 × PBS、CPC (10、50、および 250 μg/mL) および Triton X-100 (1%) で室温で 10 分間処理しました。混合物を 2.5% グルタルアルデヒドを用いて 4 °C で 24 時間固定しました。固定サンプル (5 μL) をパラフィルムのシート上に置きました。 Formvar Film (#10-1009、応研商事、東京、日本) を各液滴上に置き、ウイルスを 5 分間吸着しました。グリッドをDDWで洗浄し、ろ過した2.0%酢酸ウラニル溶液の滴上にさらに1分間置き、風乾し、JEM-1400 TEM (JEOL、東京、日本)を80 kVで使用して検査しました。

統計分析は、Graphpad Prism v9 (GraphPad Software Inc.、サンディエゴ、カリフォルニア州、米国) を使用して実行されました。データは、生物学的トリプリケートの平均値 ± SD として表示されます。統計分析は一元配置分散分析を使用して実行されました。すべてのデータセットについて、0.05 未満の p 値が有意であるとみなされました。

この研究はヘルシンキ宣言に従って実施され、北海道大学の倫理委員会によって承認されました（承認番号：2021-2）。

研究に関与したすべての被験者からインフォームドコンセントを得た。

現在の研究中に生成されたデータセット、および/または現在の研究中に分析されたデータセットは、合理的な要求に応じて責任著者から入手できます。

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著者らは、英語のレビューをしていただいた Enago (www.enago.jp) に感謝いたします。この研究は、JST SPRING、助成番号 JPMJSP2119 によって支援されました。参加者の同意を得て唾液を提供していただいたボランティアの皆様に感謝いたします。有益なコメントと提案をくださった国際人獣共通感染症研究所のメンバー全員に感謝いたします。

北海道大学歯学部・大学院歯学研究科血管生物学・分子病理学

Ryo Takeda, Nako Maishi, Takuya Tsumita & Kyoko Hida

北海道大学歯学部および大学院歯学研究科口腔診断医学

Ryo Takeda & Yoshimasa Kitagawa

北海道大学国際人獣共通感染症研究所分子病態生物学分野

Hirofumi Sawa, Michihito Sasaki & Yasuko Orba

北海道大学国際人獣共通感染症研究所国際連携ユニット

Hirofumi Sawa & Yasuko Orba

北海道大学ワンヘルス研究センター（札幌市）

Hirofumi Sawa

北海道大学大学院歯学研究科教育研究支援課

Natsumi Ushijima

社会福祉ネットワーク、北海道大学病院、札幌市

Yasuhiro Hida

北海道大学歯学部・大学院歯学研究科修復歯科学

Hidehiko Sano

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概念化、KH、HS、YK、HS。方法論、MS および HS。正式な分析、調査、データのキュレーションと視覚化、RT、MS、および NU。データ解釈、NM および TT。執筆—原案準備、RT。執筆 - レビューと編集、HS、YO、YH、KH。監修、HS、KH。プロジェクト管理、HS および KH。資金調達、RT および KH すべての著者は、提出された原稿のバージョンを読み、同意しました。

Correspondence to Kyoko Hida.

著者らは競合する利害関係を宣言していません。

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転載と許可

武田良、澤博、佐々木正他 SARS-CoV-2に対するうがい薬中の塩化セチルピリジニウムの抗ウイルス効果。 Sci Rep 12、14050 (2022)。 https://doi.org/10.1038/s41598-022-18367-6

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受信日: 2022 年 3 月 18 日

受理日: 2022 年 8 月 10 日

公開日: 2022 年 8 月 18 日

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-022-18367-6

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